細胞實驗技術服務

提供專業的細胞學技術服務,一流的實驗設備,多年的服務經驗,一流的技術團隊。

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細胞實驗技術服務主要內容:

穩定細胞株篩選服務內容和流程:1)常規細胞:a. 殺傷曲線繪制;b. 轉染質粒,鋪板,用不同的抗生素濃度篩選細胞單克??;c. qPCR或Western Blot檢測穩定克隆的外源基因表達水平。2)特殊細胞:a. 根據細胞特點、實驗特點或實驗需求,設計實驗方案并與客戶探討確定實驗方案;b. 預實驗,通過轉染含有GFP報告基因的質粒確定轉染試劑,并優化轉染條件;c. 殺傷曲線繪制;d. 轉染質粒,鋪板,用不同的抗生素濃度篩選細胞單克??;e. qPCR或Western Blot檢測穩定克隆的外源基因表達水平。

原代細胞分離實驗:常規細胞培養實驗和構建細胞模型,進行形態學、基因水平和蛋白質(組)水平的實驗。服務內容:細胞原代培養、細胞傳代培養、3D細胞培養。實驗周期:視具體實驗定。


細胞轉染實驗服務內容和流程:1)質粒:a. 進行預實驗,通過轉染含有報告基因的質粒優化轉染條件;b. 轉染條件確定后,按照客戶方案進行轉染;c. qPCR或Western Blot檢測轉染效率。2)SiRNA:a. 根據基因序列,設計并合成siRNA;b. 進行預實驗,通過轉染帶有熒光標記的陰性對照siRNA優化轉染條件;c. 通過qPCR和Western Blot驗證siRNA的沉默效率,篩選siRNA使用濃度。


細胞活力檢測(MTT法):在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力。噻唑蘭,簡稱MTT,可透過細胞膜進入細胞內,活細胞線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性MTT還原為難溶于水的藍紫色的Formazan結晶并沉積在細胞中,結晶物能被二甲基亞砜(DMSO)溶解,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映細胞數量。


細胞凋亡實驗:細胞凋亡是指為維持內環境穩定,由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同,細胞凋亡不是一件被動的過程,而是主動過程,它涉及一系列基因的激活、表達以及調控等的作用;它并不是病理條件下,自體損傷的一種現象,而是為更好地適應生存環境而主動爭取的一種死亡過程。


流式細胞檢測:流式細胞術(Flow Cytometry,FCM)是一種對液流中排成單列的細胞或其它生物微粒(如微球,細菌,小型模式生物等)逐個進行快速定量分析和分選的技術。該技術廣泛的運用于從基礎研究到臨床實踐的各個方面,涵蓋了細胞生物學、免疫學、血液學、腫瘤學、藥理學、遺傳學及臨床檢驗等領域。


耐藥株誘導實驗:采用體外低濃度梯度遞增聯合大劑量間斷沖擊方法誘導腫瘤細胞對藥物產生耐藥性。諸如:人乳腺癌阿霉素耐藥細胞株、人乳腺癌紫杉醇耐藥株、人肺腺癌紫杉醇耐藥株、人肝癌氟尿嘧啶耐藥株、人結腸癌長春新堿耐藥株、人口腔上皮癌長春新堿耐藥株、人結腸癌紫杉醇耐藥株、人結腸癌氟尿嘧啶耐藥株、人卵巢癌順鉑耐藥株、人白血病阿霉素耐藥株、人卵巢癌紫杉醇耐藥株、人胃癌順鉑耐藥株、人白血病阿霉素耐藥株、人乳腺癌阿霉素耐藥細胞株、人結腸癌長春新堿耐藥株、人肝癌氟尿嘧啶耐藥株、人乳腺癌抗雌激素耐藥株、人乳腺癌Tamoxifen耐藥株、小鼠激素依賴性乳腺癌細胞等。


原代/傳代細胞培養(Primary/continuoua cell culture):細胞的生長需要營養環境,用于維持細胞生長的營養基質稱為培養基。培養基按其物理狀態可分為液體培養基和固體培養基。從多細胞生物中分離所需要細胞和擴增獲得的細胞以及對細胞進行體外改造,觀察,必須解決細胞離體培養問題,同微生物細胞培養的難易相比,比較困難的是來自多細胞生物的單細胞培養,特別是動物細胞的培養。


細胞活力檢測(Cell viability test):活細胞中的脫氫酶能將MTT還原成不溶于水的藍紫色產物(甲臜,Formazan),并沉淀在細胞中,而死細胞沒有這種功能。二甲亞砜(DMSO)能溶解沉積在細胞中的藍紫色結晶物,溶液顏色深淺與所含的Formazan量成正比,用酶標儀測定OD值。


穩定轉染(Stable transfection):穩定轉染或持久的轉染是用于建立克隆的細胞系,這種細胞系中轉染的目的基因整合到染色體DNA中并指導適量目的蛋白的合成。一般來說(由細胞類型決定),形成穩定轉染細胞的效率比瞬時轉染的效率低1到2個數量級。利用可選擇的遺傳標記物有利于從非轉染細胞的畢竟中分離出稀少的穩定轉染物。


瞬時轉染(Transient transfection):采用瞬時轉染的方法能夠方便快捷地對基因功能進行研究與分析,且基因表達水平高,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其他調控元件的分析。一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染后24-72小時內(依賴于各種不同的構建)分析結果,常常用到一些報告系統如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來幫助檢測。

細胞實驗服務常用的實驗室裝備

細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構建也是各個細胞實驗服務公司或者院校必備的實驗室。以下是部分實驗室儀器設備:

一、CO2培養箱

CO2培養箱是細胞培養的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養的舒適環境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等,主要應用于組織工程、體外受精、神經系統科學、癌癥研究和其他哺乳動物細胞研究等。細胞在體外培養時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。

co2實驗箱

ESCOCelCulture系列CO2培養箱具有穩定的培養環境、專業的滅菌功能和獨特的抑菌功能。如90℃,14Hour即可完成濕熱滅菌過程,能有效殺死各種微生物;Ulpa過濾器,腔體內達到5級空氣質量;不銹鋼拋光內膽,有效抑制微生物附著;ESCO特有的ISOCIDETM表面抗菌涂層技術可有效地意識微生物在箱體表面滋生,實驗證明,24小時內,消除箱體表面的99.9%的細菌??煽康男閱?,簡潔的操作,完美的設計,為各種類型細胞提供合適的培養條件,講幫助您的科學夢想變成現實更近一步!
二、超凈工作臺/生物安全柜
細胞培養對無菌環境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。

新加坡ESCO超凈工作臺和生物安全柜,為您提供更加安全的防護。

生物安全柜

三、純水系統
體外培養的細胞對水質特別敏感,對水的純度要求較高。培養用水中如果含有一些雜質,即使含量極微,有時也會影響細胞的存活和生長,水中的內毒素直接參與細胞凋亡,內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化,甚至導致細胞死亡。用金屬蒸餾器制備的蒸餾水,可能會含有某些金屬離子,一般不作為培養用水。配制培養用液應使用經石英玻璃蒸餾器三次蒸餾的三蒸水或超純水凈化裝置制備的超純水。
美國密理博Millipore公司成立于1945年,總部在美國麻省波士頓,在全世界三十多個國家和地區有子公司和辦事處,為一百多個國家和地區提供產品和技術服務。目前公司全球雇員超過5,800人。自上世紀六十年代起,密理博就已經開始致力于實驗室用純水系統的研究和開發,為世界各地高校和臨床、制藥實驗室提供日產幾升至幾千升的超純水(I級)、分析級水(II級)和實驗室級水(III級)純化系統。多年來,Milli-Q、Elix、Super-Q、RiOs、Direct-Q和Simplicity等品牌在各類科學文獻中隨處可見,已經成為全球科研工作者心目中的權威品牌。
四、液氮罐
為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環境中,一般細胞可以保存十年具有活性。

MVE XC系列液氮罐的容量自700 – 5000管及150至1000多個凍存管。產品持久耐用、重量輕,制造技術世界領先,并有5年的真空保證。


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